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發布時間:2021-09-07 10:23  
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進樣器的維護給樣機可分為手動和自動兩種,盡管它們的工作方式不同,但其使用要點基本相同。自動進樣器常見的問題是交叉污染,造成交叉污染的原因非常直接,樣品在進樣針的內外表面都殘留著樣品,然后再進入色譜系統。要解決交叉污染,主要靠清潔。2、操作精細,手動進樣器的操作要領大致相同,應使用液相色譜 LC進樣針,進樣時要插到針頭,不使用時要將針頭留在進樣器內,在使用前后要及時清洗。
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色譜柱維護化合物分離的關鍵是色譜柱。維護好的色譜柱具有很高的塔板數量,儀器基線穩定。1、避免壓力、溫度急劇變化和機械振動。氣溫驟降或使色譜柱從高處落下,都會影響柱內填充狀態;柱壓突然升高或降低,也會對柱內填充物產生沖力,所以在調節流速時要緩慢進行,在閥進樣時閥的轉動不能過緩(如前面所述)。2、溶劑的組成應逐漸改變,尤其是反相色譜,不能直接由改為全水,反之亦然。3、色譜柱反沖,納譜分析小分子分離液相色譜柱 ChromCore系列和 EcoPak系列色譜柱進行反沖;納譜分析的手性色譜柱 UniChiral系列色譜柱可以反沖、反沖去除留在柱頭的雜質。而納譜分析生物大分子液相色譜柱 BioCore系列色譜柱不能反沖,否則反沖會迅速降低柱效。4、為避免破壞固定相,選擇合適的流動相(特別是 pH)。有時候,一預柱可以在進樣器前連接,分析柱是硅膠粘合時,預柱為硅膠,可使流動相在進入分析柱前先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質溶解。
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峰丟失的故障
導致漏峰的原因主要有兩種:一是氣路中的污染,二是氣路未分離。
情況可以通過多次空轉和清洗氣路(進樣口、檢測器等)來解決。
1、為減少對氣路的污染,可采取如下措施:程序升溫后階段,應進行高溫清洗;
2、樣品進樣應保持清潔;
3、減少使用高沸點油類物質;
4、采用盡可能高的進樣口溫度、柱溫和檢測器溫度。
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峰丟失的第二種情況是峰未分開,除上述原因外,還有可能是由于系統污染引起的柱效下降或柱子老化引起,而柱子的老化所造成的峰損失則是漸進的、緩慢的。
系統污染和漏氣是造成假峰現象的主要原因,通過檢查漏氣、除污等措施加以解決。日常工作中應記錄正常時基線的情況,以便維修時參考。
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層析柱的常見問題分為三個方面,即色譜柱污染、堵塞、固定相流失。造成色譜柱污染的原因通常是對高沸點雜質的吸附,會影響分析組分與固定相的正常吸附,導致基線噪聲變大,產生前沿峰、拖尾峰、雜亂峰和未知峰等,解決色譜柱污染的常用方法是老化色譜柱,一般設置柱溫低于溫度極限30℃,老化10 h以上。細雜物質顆粒進入色譜柱導致柱子堵塞,導致基線電流增加、前沿峰、分叉峰、肩峰等異常峰形,甚至不出峰,一般情況下,要剪去柱子上幾厘米的切割器(如毛細管切割器或金剛石玻璃刀),切口要與柱子內壁成90°,而且要保證柱子切口干凈,否則柱切口處產生的湍流渦旋將對峰的形狀造成不利影響,對進樣器和檢測器的長度也有要求,通常插入進樣器和檢測器的深度分別為2.5 cm和8.5 cm [4]。由于固定相位丟失,柱效下降,基線漂移,基線電流增加,峰形不規則,柱效下降的嚴重程度可以通過降低柱溫至室溫,觀察基線是否可調零來判斷,可嘗試剪掉色譜柱的一定距離,如果不可調零則表示固定相流失嚴重,則應更換新的色譜柱。
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