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發布時間:2020-09-05 05:32  
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PCR實驗室是分子診斷的基礎,也是進行PCR實驗的必備場所。近些年,分子診斷行業快速發展,對PCR的認識又進入到了一個新的階段,但是基于實驗室的基本知識仍然是非常重要的一環。
PCR實驗室注意事項——標本制備區
由于在樣本混合、核酸純化過程中可能會發生氣溶膠所致的污染,可通過在本區內設立正壓條件,避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。
PCR實驗室注意事項——擴增產物分析區
用過的吸頭也必須放至1 mol/L HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理,如焚燒。由于本區有可能會用到某些可致基因突變和有毒物質,故應當注意實驗人員的安全防護。
PCR實驗室布局
不同功能的工作區應是分隔獨立的,各工作區有明顯的標志,不能直通,如果緊密相連,需安裝物品傳遞窗。前兩區為擴增前區,后兩區為擴增后區,擴增前區與擴增后區應嚴格分開。
PCR實驗室裝飾
實驗室圍護結構應牢固、氣密性好;所有陰陽角宜采用圓弧過渡;墻體內壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒;地面使用PVC卷材或環氧樹脂自流坪,材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
PCR實驗室注意事項
幾個區域的大小設置情況,試劑準備區、擴增區、擴增產物分析區,空間可以相對小一些,樣品制備區要放置生物安全柜和低溫冰箱,空間應大一些。
PCR實驗室工作基本原則
實驗室的清潔應當按試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物分析區的方向進行。不同的實驗區域應當有其各自的清潔用具以防止交叉污染。
PCR實驗室各區功能及主要設備
樣品制備區:主要進行樣品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。本區主要設備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。
PCR實驗室原則上為試劑準備區、樣品制備區、擴增區和擴增產物分析區四個單獨的工作區域并設有專用走廊,各工作區域應設緩沖間,工作區與緩沖間宜安裝連鎖裝置。
PCR實驗室工作基本原則
工作結束后,必須立即對工作區進行清潔。工作區的實驗臺表面應當可耐受諸如化學物質的消毒清潔作用。實驗臺表面的紫外照射應當方便有效。
PCR實驗室通風系統及壓力控制
各區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗之間的相互干擾,防止氣溶膠擴散對實驗過程造成污染。
PCR實驗室注意事項——試劑儲存和準備區
貯存試劑和用于標本制備的消耗品等材料應當直接運送至試劑貯存和準備區,不能經過擴增檢測區,試劑盒中的陽性對照品及質控品不應當保存在該區,應當保存在標本處理區。