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發布時間:2021-05-26 08:20  
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你對制備色譜陌生嗎?還不進來看看它的特點
很多初接觸色譜領域的朋友對制備色譜這個名詞比較陌生。其實,在化學化工醫學等廣泛采用的層析法以及薄層色譜就是較為典型的制備色譜,換句話說,將分析色譜的進樣量增大,同時得出大量的所需物質(餾分)的過程就可以稱為制備色譜。分析色譜的目的,是分析出混合物中一個(或者幾個)純物質的含量。制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質。而制備色譜系統則是利用制備色譜的思想能得到純化物質的多個分析測試設備聯用的總稱。 分析色譜是制備色譜的基礎。當我們在分析色譜上取得了良好的分離效果時,可以將其放大,應用到制備色譜上,由此,我們需要考慮調整上樣量,流速,梯度:
1.上樣量的調整: 他與分析色譜柱和制備色譜柱的柱長和柱內徑有關:
具體關系時;制備柱上樣量/分析柱上樣量=制備柱長/分析柱長*制備柱內徑的平方/分析柱內徑的平方;
2.流速的調整:
制備柱流速/分析柱流速=制備柱體積/分析柱體積=制備柱長/分析柱長制備柱內徑的平方/分析柱內徑的平方;
3.梯度的調整:
制備柱梯度/分析柱梯度=制備柱體積/分析柱體積*制備柱流速/分析柱流速;
液相色譜儀應用范圍
它的應用范圍比較大,而且有不斷拓展的趨勢。制備純化樣品是它的基礎功能,通過色譜分離,樣品中目標物質被分離出來有待進一步研究,比如分離水樣中有機物、食品中以備分析等。然后是天然成分研究,有助于中藥學的發展。分析前人留下的珍貴藥典,通過藥性研究造福人類。提高產品質量,以提高它的價值和效用,比如純化藥品、純化蛋白質制品等。還有一個方向是用于產品合成的研究,通過獲得一些純度較高的化合物將以促進合成實驗的進行。
液相色譜的應用
(1)分離混合物液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。通過與試樣預處理技術相配合,液相色譜法所達到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時測定性質上十分相近的物質,能夠分離復雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發展,還可在充分保持生化物質活性的條件下完成對其的分離。
(2)生化分析由于液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、藥的研究、環境分析、無機分析等各種領域,并已成為解決生化分析問題有前途的方法。
(3)儀器聯用液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。液相色譜一質譜聯用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯多核芳烴等:液相色譜一紅外光譜聯用也發展很快,如在環境污染分析測定水中的烴類等.使環境污染分析得到新的發展。
液相色譜儀分類
液相色譜儀依據樣品在固定相和流動相分離過程的物理化學原理,可分為以下五種。
1、吸附色譜:
用固體吸附劑作固定相,以不同極性溶劑作流動相,依據樣品中各組分在吸附劑上吸附性能的差別來實現分離。
2、分配色譜:
用載帶在固相基體上的固定液作固定相,以不同極性溶質作流動相,依據樣品中各組分在固定液上分配性能的差別來實現分離。根據固定相和液體流動相相對極性的差別,又可分為正相分配色譜和反相分配色譜。當固定相的極性大于流動相的極性時,可稱為正相分配色譜或簡稱正相色譜;若固定相的極性小于流動相的極性時,可稱為反相分配色譜或簡稱反相色譜。
3、離子色譜:
用微粒離子交換劑作固定相,以具有一定pH值的緩沖溶液作流動相,依據離子型化合物中各離子組分與離子交換劑上表面帶電荷基團進行可逆性離子交換能力的差別而實現分離。
4、體積排阻色譜:
用化學惰性的多孔性凝膠作固定相,按固定相對樣品中各組分分子體積排阻滯作用的差別來實現分離。以水溶液作流動相的體積排阻色譜柱,稱為凝膠過濾色譜;以有作流動相的體積排阻色譜法,稱為凝膠滲透色譜法。
5、親和色譜:
以在不同基體上,鍵合多種不同特性的配位體作固定相,用具有不同pH值的緩沖溶液作流動相,依據生物分子與基體上鍵聯的配位體之間存在特異性親和作用能力的差別,而實現對具有生物活性的生物分子的分離。