C8固相萃取柱選擇詢問報價「碩譜生物」

廣州碩譜生物科技有限公司，SPE小柱，是目前國內生產SPE小柱較好的生產廠家。C8固相萃取柱選擇

防爆小柱體應用原理

固相萃取(SPE)技術是隨著樣品預處理要求的逐漸提高而被廣泛應用的。樣品經選擇性吸附和洗脫后，進行富集分離。通常采用的方法是使液體樣品經過吸附劑，保留其中的被測物質，然后選擇適當強度的溶劑沖去雜質，然后用少量的溶劑對被測物質進行洗脫，從而實現(xiàn)快速分離、凈化和濃縮。還可以選擇性地吸附干擾雜質，讓被測物質外流；或者同時吸附雜質和被測物質，再用適當?shù)娜軇┻x擇性地洗脫。使用 SPE小柱的過程，以下我們將填充物設置為保留的目標化合物。預洗-活化-去除柱體中的雜質，即飽和平衡柱體。采用強、弱溶劑(緩沖液)依次激1活。上樣法——將樣品(包括分離物和干擾物)溶解在一種溶劑中，轉移到柱中，使組分通過吸附劑，吸附劑有選擇地吸附保留的分離物和某些干擾物。淋洗——用合適的溶劑淋洗吸附劑，將先前保留的干擾物選擇性地淋洗掉，分離物富集后留在吸附劑上。洗脫-用小容量溶劑從吸附劑中洗脫所測物質并收集。

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正離子交換填料(SCX, MCX)

·分析物：陽離子(堿性)化合物

·方法：

(a)活化：樣品溶劑可在非極性有機溶1劑中活化；在極性溶劑中的樣品中，可在水溶性有機溶1劑過柱后與水平衡，然后以適當 pH值的緩沖溶液平衡。

5.溶劑洗脫強度：

-反相溶劑的洗脫強度：

水樣→甲1醇→異丙1醇→乙1腈→丙1酮→醋1酸乙1酯→乙1醚→四1氫呋1喃→二1氯甲1烷→氯1仿

四氯化1碳→異辛1烷→己1烷

正相溶劑洗脫強度：

己1烷→異辛1烷→四氯化1碳→氯1仿→二氯甲1烷→四氫呋1喃→乙1醚→乙1酸乙1酯→丙1酮→丙1酮

乙1腈，異丙1醇，甲1醇。

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對正相體系，先對目標化合物的正己烷溶液進行上樣，然后用5%、10%、20%、30%、40%、60%、70%、80%、90%和的正己烷溶液對目標化合物進行洗脫，分別收集洗脫液的分析結果，建立淋洗曲線，確定目標化合物洗脫后的溶劑體系，淋洗后的甲1基叔丁基1醚含量應略低于目標化合物恰好被洗脫時的溶劑體系，而洗脫液中甲1基叔丁基1醚的含量應略高于目標化合物正好被洗脫時的溶劑體系。

合理處理 SPE柱，在 SPE柱中，吸附劑可能存在少量干擾物，有效活化可避免干擾物進入洗脫液中，活化溶液應選擇整個洗脫過程中洗脫強度zui高的溶劑體系。

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樣本制備問題

大部分流速問題是由于樣品制備不當造成的。例如樣品混濁、離心過濾不充分造成上樣時篩板堵塞，或樣品本身的蛋白質等大分子物質處理不當，造成有效蛋白沉降，造成篩板堵塞。通過改進前處理方法，可解決由這種原因引起的流速問題。因此，樣品準備是保證 SPE正常流動速度的di一步。

小柱子本身因素(填充尺寸和柱子體積)

充填粒徑的作用，大充填粒徑的充填越疏松，流動相阻力越小，流速越快；小充填粒徑的作用，充填越緊，流速越慢。這一現(xiàn)象在弗羅里硅土和硅藻土小柱中都很明顯。小柱粒徑范圍一般為40-60 um，農殘級弗羅里硅土的粒徑范圍為75-150 um，大柱粒徑范圍為600-900 um。因此弗羅里硅土和硅藻土小柱的流速會比一般小柱要快，特別是大孔硅藻土小柱，在使用時需要配以導流針來控制流速。

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由于非極性溶劑不能與極性固定相材料形成具有氫鍵的官能團，因此非極性基質環(huán)境對吸附劑和目標化合物之間的極性作用力是有利的。結果表明：在極性作用下，樣品的固相萃取過程中，基質主要是正己烷、二氯甲i烷、菜油等非極性基質，而所制備的化合物多含有極性大的官能團。

極性固定相抽提材料包括：硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土和含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2 OH)的粘接硅膠。

在正相固相萃取模式中，溶劑體系的極性應按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞增，并隨洗脫強度的增加而增加。要確保所選的樣本溶劑不會洗脫目標化合物，所選的淋洗劑應在不洗脫目標化合物的前提下，zui大限度地洗脫干擾物，這樣，洗脫劑應恰好洗脫目標化合物。

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有些情況下，用有i機溶劑清洗污染的柱子是不成功的，特別是當有金屬離子吸附到硅膠或粘合劑中時：

可使用諸如0.05 M EDTA (EDTA)等鰲合劑沖洗色譜柱， EDTA可將其與許多金屬離子絡合溶解。EDTA溶液用完后，必須用足夠的水沖洗柱子。若樣品含有離子化合物，改變 pH可使其轉變?yōu)榉请x子狀態(tài)，并可通過水/有i機溶劑進行洗脫。舉例來說，在 pH低于3時，強堿性雜質可以被去除，在這種條件下，質子銨水溶性更好。當 pH大于其 pKa時，酸性雜質可以被洗掉——大約是pH8或9，這時，酸性雜質是離子態(tài)。但是要注意的是，硅膠柱在長時間的高 pH環(huán)境中很容易被破壞。

選用 SPE柱規(guī)格的原則是，首先要確保 SPE柱的填料具有足夠的容量，以便將目標化合物100%保留在柱體上。另外，填料也不易過量。填充物越多，溶劑對目標化合物的洗脫效果就越好。

所以在選擇 SPE柱規(guī)格時，一定要考慮 SPE柱的容量。柱容是指一單位質量的填料以主要力保持其質量。鍵合型硅膠柱容量一般為1%~5%。

例如， SPE柱的填料為100 mg，其大容量一般不超過5 mg。該離子交換劑柱容量約為0.5~1.5 meq/g。需要指出的是，由于我們面對的是多種混合物，除了目標化混合物之外，還存在很多干擾。

因此，在選擇柱狀規(guī)格時，必須考慮到目標化合物及其在萃取條件下可能吸附的總數(shù)量，而不能只考慮目標化合物。另外，即使目標化合物未超過柱容量， SPE柱在保留目標化合物的同時也保留了部分干擾物，由于兩者的總量已超過柱容量，其結果必然是部分目標化合物無法保留在 SPE柱中。所以為安全起見，建議柱容好比目標化合物估計含量高一倍。