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發布時間：2021-10-15 07:29
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{微生物檢測}微生物培養
培養
1、根據培養時是否需要氧氣，可分為好氧培養和厭氧培養兩大類。
好氧培養：也稱“好氣培養”。就是說這種微生物在培養時，需要有氧氣加入，否則就不能生長良好。在實驗室中，斜面培養是通過棉花塞從外界獲得無菌的空氣。三角燒瓶液體培養多數是通過搖床振蕩，使外界的空氣源源不斷地進入瓶中。
厭氧培養：也稱“厭氣培養”。這類微生物在培養時，不需要氧氣參加。在厭氧微生物的培養過程中，zui重要的一點就是要除去培養基中的氧氣。
2、根據培養基的物理狀態，可分為固體培養和液體培養兩大類。
固質培養：是將jun種接至疏松而富有營養的固體培養基中，在合適的條件下進行微生物培養的方法。
液體培養：在實驗中，通過液體培養可以使微生物迅速繁殖，獲得大量的培養物，在一定條件下，還是微生物選擇增菌的有效方法。
抑菌效力
銅綠假單胞菌菌懸液：接種銅綠假單胞菌的新鮮培養物至胰酪胨大豆肉湯培養基中，30～35℃培養18～24小時；取上述培養物用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至
用比濁法制成每1ml含菌數約為108cfu。
8.2.2金黃色pt球菌菌懸液：接種金黃色pt球菌的新鮮培養物至胰酪胨大豆肉湯培養基，30～35℃培養18～24小時；取上述培養物用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至 ，用比濁法制成每1ml含菌數約為108cfu。
微生物限度檢查
計數方法適用性試驗
1.供試液制備
根據供試品的理化特性與生物學特性，采取適宜的方法制備供試液。供試液制備若需加溫時，應均勻加熱，且溫度不應超過45℃。供試液從制備至加入檢驗用培養基，不得超過1 小時。
常用的供試液制備方法如下。如果下列供試液制備方法經確認均不適用，應建立其他適宜的方法。
（1）水溶性供試品 取供試品，用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，或pH7.2磷酸鹽緩沖液，或胰酪大豆胨液體培養基溶解或稀釋制成1：10供試液。若需要，調節供試液pH值至6～8。15-2010食品安全標準食品微生物學檢驗霉菌和酵母計數GB4789。必要時，用同一稀釋液將供試液進一步10倍系列稀釋。水溶性液體制劑也可用混合的供試品原液作為供試液。
（2）水不溶性非油脂類供試品 取供試品，用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，或pH7.2磷酸鹽緩沖液，或胰酪大豆胨液體培養基制備成1：10供試液。分散力較差的供試品，可在稀釋液中加入表面活性劑如0.1%的聚山梨酯80，使供試品分散均勻。40-2010食品安全標準食品微生物學檢驗阪崎腸gan菌檢驗GB4789。若需要，調節供試液pH值至6～8。必要時，用同一稀釋液將供試液進一步10倍系列稀釋。
（3）油脂類供試品 取供試品，加入無菌十四烷酸異丙酯使溶解，或與zui少量并能使供試品乳化的無菌聚山梨酯80或其他無抑菌性的無菌表面活性劑充分混勻。表面活性劑的溫度一般不超過40℃（特殊情況下，zui多不超過45℃），小心混合，若需要可在水浴中進行，然后加入預熱的稀釋液使成1：10供試液，保溫，混合，并在zui短時間內形成乳狀液。金黃色葡萄qiu菌(Staphylococcusaureus)是人類的一種重要病原菌，隸屬于葡萄qiu菌屬(Staphylococcus)，有"嗜肉菌"的別稱，是革蘭氏陽性菌的代表，可引起許多嚴重gan染。必要時，用稀釋液或含上述表面活性劑的稀釋液進一步10倍系列稀釋。
3.抗jun活性的去除或滅活
供試液接種后，按下列“微生物回收” 規定的方法進行微生物計數。若試驗組菌落數減去供試品對照組菌落數的值小于菌液對照組菌落數值的50%，可采用下述方法消除供試品的抑菌活性。
（1）增加稀釋液或培養基體積。
（2）加入適宜的中和劑或滅活劑。
中和劑或滅活劑（表2）可用于消除干擾物的抑菌活性，zui好在稀釋液或培養基滅菌前加入。若使用中和劑或滅活劑，試驗中應設中和劑或滅活劑對照組，即取相應量稀釋液替代供試品同試驗組操作，以確認其有效性和對微生物無毒性。食源病原微生物可通過接觸物表面、水、土壤、空氣、排泄物、食物等媒介傳播，從而污染“從農田到餐桌”的食物鏈任何環節。中和劑或滅活劑對照組的菌落數與菌液對照組的菌落數的比值應在0.5～2 范圍內。
（3）采用薄膜過濾法。
（4）上述幾種方法的聯合使用。
若沒有適宜消除供試品抑菌活性的方法，對特定試驗菌回收的失敗，表明供試品對該試驗菌具有較強抗jun活性，同時也表明供試品不易被該類微生物污染。但是，供試品也可能僅對特定試驗菌株具有抑制作用，而對其他菌株沒有抑制作用。——{微生物檢測}常規鑒定技術二——(二)生理生化試驗微生物生化反應：指用化學反應來測定微生物的代謝產物，生化反應常用來鑒別一些在形態和其它方面不易區別的微生物。因此，根據供試品須符合的微生物限度標準和菌數報告規則，在不影響檢驗結果判斷的前提下，應采用能使微生物生長的更高稀釋級的供試液進行計數方法適用性試驗。若方法適用性試驗符合要求，應以該稀釋級供試液作為zui低稀釋級的供試液進行供試品檢查。
