辛基SPE柱分類誠信企業【碩譜生物】

廣州碩譜生物科技有限公司辛基SPE柱分類

離子交換固相萃取小柱方法開發中需要注意的問題。

離子交換固相萃取適用于可解離成帶電離子的化合物，其機理是利用帶電荷的目標化合物離子與帶相反電荷的吸附劑之間的靜電吸引力。樣品基質可以是極性的，如水溶液，也可以是非極性的有機溶液，但在實際應用中以水溶液較多，包括生物體液、江河湖海等自然水、廢水等。

常見反相鍵合硅膠吸附劑的類型

C18柱

C18是目前使用zui多的一種SPE柱，根據2003年的一項統計，在所有使用

的SPE柱中，C18柱占了56％左右。C18柱的主要官能團是十八烷基( octade-cyl),其主要作用力是非極性，第二作用力是極性、陽離子交換。在所有鍵合硅

膠SPE吸附劑中，C18柱的非極性吸附能力zui強。因此，強非極性化合物被C18

吸附后可能較難洗脫。C18難吸附極性非常強的分子，如碳水化合物( carbohy

-drates).C18一般被當作zui沒有選擇性或通用型的吸附劑，因為絕大多數有機分子或多或少含有非極性基團，C18可以從水溶液中吸附這些有機化合物。因此C18對于同時分離不同結構的化合物時較為適用。由于C18的選擇性較低，其zui終萃取物往往沒有其他選擇性高的填料那么干凈。在蛋白質純化中，C18柱是優1秀的除鹽工具，因為樣品中的鹽在C18柱上沒有保留。C18的極性副作用力比其他鍵合硅膠SPE吸附劑低許多，主要是碳鏈較長的原因。

固相萃取小柱的選擇固相萃取柱的種類很多，具體實驗工作中，需根據分析對象、檢測手段及實驗室條件合理選擇合適填料、合理規格的固相萃取柱。要考慮固相萃取柱對分析對象的萃取能力、樣品溶液的體積、洗脫后溶液的zui終體積、及樣品溶液中被測物及干擾物的總量。

一般被柱中吸附劑吸附的被測物及干擾物的總質量不應超過吸附物總質量的5%。洗脫劑的體積一般應是萃取柱柱床體積的2-5倍。?

回收率低在一次完整的SPE操作中，目標化合物可能會存在于樣品溶液流出液、淋洗液、洗脫液或吸附劑中，當“目標物沒有回收或回收率低” 現象發生時，可向樣品溶液加入標液，然后進行完整的SPE操作并將樣品流出液、淋洗液和洗脫液分別收集并分析。

首先確定目標化合物存在于哪一部分，進而確定問題來自下列哪一環節：目標化合物在吸附劑上保留不足；目標化合物未被完全洗脫；其他環節。

色譜柱的技術都有哪些？比如封尾等，這些技術在應用時都體現在哪里？

答：色譜柱技術包括填料技術和裝柱技術，填料技術自不待言，填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術也沒有想象中的這么簡單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內徑和長度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩定、均一的柱床，更多是一門藝術，需要經驗積累。

固相萃取（SPE）技術是目前十分常見的樣品前處理方法，廣泛應用于食品、環境、生物樣品等諸多領域的檢測。在規格種類繁多的固相萃取柱（SPE小柱）中，聚乙烯吡咯烷酮基質SPE(如常見的HLB小柱)占有重要一席。

這類基質具有良好的水可浸潤性和化學穩定性，表面同時具有親水性和疏水性官能團，從而對各類極性、非極性化合物具有均衡的吸附作用。其吸附能力大，樣品容量高，對大部分有機物的吸附容量增大，回收率也更高，且在吸附后有機物容易被定量洗脫。

固相萃取柱的預處理

在萃取樣品之前，吸附劑必須經過適當的預處理，一足為了潤濕和活化固相萃取填料，以使目標萃取物與固相表面緊密接觸，易于發生分子間相互作用；二是為了除去填料中可能存在的雜質．減少污染。采取的方法是用一定量溶劑沖洗萃取柱。

反相類型的固相萃取硅膠和非極性吸附劑介質，通常用水溶性有機1溶劑如甲1醇預處理，甲1醇潤濕吸附劑表面和滲透鍵臺烷1基相，便于水更有效地潤濕硅膠表面。然后用水或緩沖溶液替換滯留在柱中的甲1醇，以使樣品水溶液與吸附劑表面有良好的接觸，提高萃取效率。正相類型的固相萃取硅膠和極性吸附劑介質，通常用樣品所在的有機1溶劑來預處理。離子交換填料一般用3—5ml。去離子水或低濃度的離子緩沖溶液來預處理。