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              發布時間:2021-01-04 22:40  

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              生物緩沖液Tris是一種氨基獨一不含鈉的氨基緩沖堿,不會給體系中帶入鈉、鉀離子,不影響滲透壓,必要時也可以加入生理鹽水調節鹽平衡。其對生物化學過程的影響很小,也不會與鈣、酶及重金屬離子生成沉淀,不影響激酶、磷酸酶、脫氫酶等多種酶的活性。通常用于DNA、RNA及蛋白質相關的實驗,常用緩沖體系有:Tris-HCl緩沖液、TBS緩沖液、TE緩沖液、TAE緩沖液、TBE緩沖液、Tris甘氨酸緩沖液、Tris磷酸緩沖液等。需要注意的是Tris的pH值受溫度影響較大,要注意控制好溫度;Tris溶液顯堿性,會吸收CO2,要注意密封。




               總的來說,TCEP是這三個還原劑中穩定的,但它也是昂貴的。我通常在純化過程的緩沖液中添加DTT,在后保存酶液的緩沖液中添加TCEP。一般比較合理的還原劑濃度是5~10mM?;旧夏阋_保還原劑濃度要遠遠高于你的蛋白濃度。因為DTT和巰在室溫下就會降解,所以需要將添加了還原劑的緩沖液處于低溫保藏,或者在使用時再添加還原劑。


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