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12h膠凍樣類芽孢桿菌的斜面,無菌操作涂片

方法

（1）取培養12 h膠凍樣類芽孢桿菌的斜面，無菌操作涂片，經革蘭氏染色后觀察其菌體形態；同時在斜面中加入一定量的無菌水，涂布于檢測培養基上，于32 ℃倒置培養36 h，觀察其菌落形態。

（2）從發酵終點的膠凍樣類芽孢桿菌發酵液中吸取5.0 mL于45.0 mL無菌水中，按1:10進行梯度稀釋，每個樣品取3個連續適宜的稀釋度，用0.5 mL無菌移液管分別吸取不同稀釋度菌懸液0.1 mL，均勻地涂布于檢測培養基平板上；近年來，關于復合微生物肥料的應用日趨廣泛，特別是復合微生物肥料迅速崛起，這將使我國肥料行業進入一個嶄新時代。每一稀釋度重復3次，同時以無菌水作空白對照，于32 ℃培養48 h，以出現20～300個菌落數的稀釋度的平板為計數標準，統計有效活菌數。

微生物菌肥發揮作用的方式

巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌是目前我國菌肥生產的主要。由試驗可知，微生物菌肥發揮作用的方式主要是提高土壤中可吸收鉀與磷的含量，將無效鉀、磷轉變為有效鉀、磷，供植物吸收。如果土壤中原本沒有鉀、磷元素，菌肥也不可能產生這些元素，即菌肥不能代替氮、磷、鉀肥料，只能提高土壤肥料的利用率和肥效。實際上土壤中鉀的總含量并不缺乏，只是鉀供應不足，研究和開發利用解鉀微生物，闡明其作用機理是微生物肥料研究和應用中的一個重要課題。使用菌肥后，仍需要施用常規肥料，才能保證作物的營養需求。

促成作物增產的另一因素是微生物發酵過程中所生成的植物，通過作用，作物根系活力增強，光合作用效率提高，使作物獲得充分的營養成分，終提高產量。要使這些功能更好地發揮，施加于土壤中的微生物必需成活。因施加于土壤中的總菌數一般為75000億個/公頃，總菌重約為7.5g。在土壤中微不足道，如不大量繁殖，則不能產生明顯效能。而要保證菌能在土壤中存活、生長和繁殖，則土壤中必須有供給菌生長繁殖所需的營養成分，如糖類、有機氨等。進料速率對HB-02菌株噴霧干燥芽孢收率的影響試驗證實：進料速率0。在有機質較豐富的土壤中，該菌的效能將發揮得更好。

枯草芽孢桿菌在飼料添加中的應用功效

1、維持腸道生態平衡

促進腸道有益生長，降低大腸桿菌、弧菌、桿狀病菌數量，增強抗應激能力，減少疾病發生。

2、促進生長

可產生有機酸、多種酶（淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶等）、B族維生素，吸收，提高飼料轉化率。

3、調節

刺激動物生長發育，增強抗病力，提高成活率，可替代或減少使用，防止耐藥菌的產生。

4、優化養殖環境

分解動物殘渣，降解糞漿，消除臭味；降低舍內有害氣體濃度，減少病原菌的排放，顯著凈化水質環境。

膠凍樣類芽孢桿菌固氮能力的研究認可不一

固氮功能

目前對于膠凍樣類芽孢桿菌固氮能力的研究認可不一，并且在分子水平上缺乏理論支持。

但是，膠凍樣類芽孢桿菌能夠固氮的直接證據為該類細菌可在完全無氮的培養基上生長良好，并且不適應高氮培養生長條件。

促生抗病功能

國內外學者在對膠凍樣類芽孢桿菌的研究中發現，此種細菌有刺激作物生長（分泌）和抑制作物病害作用，有的菌株能產生，甚至不止一種，能限制多種病原菌如致病性鐮刀菌、腐霉菌、立枯絲核菌所引起的許多病害。

吸附功能

膠凍樣類芽孢桿菌因多糖產量較高，具有較強的吸附能力，且具有無毒性、污染小、pH適用范圍寬以及絮凝效果好和成本低等特點，其作為絮凝劑在重金屬廢水處理等領域顯示了較大的潛力。這些多糖類絮凝物質與蛋白質類、糖蛋白類或核酸類的微生物絮凝劑相比具有更高的熱穩定性。00t/h時，單位時間內單位料液水分的蒸發量降低，霧滴變大，導致無法完全干燥霧滴，樣品的含水量較高，容易堵塞噴頭，掛壁現象嚴重，影響了產品的集粉率。