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發(fā)布時間：2021-01-15 20:19
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做親和柱時，使用Sepharose 4B 和 Sepharose CL-4B有何不同？
Sepharose 4B指4%的瓊脂糖
Sepharose CL-4B指4%高度鉸鏈的瓊脂糖
他們的區(qū)別在于鉸鏈程度不一樣，在親和層析色譜中，介質(zhì)鉸鏈程度越高，化學穩(wěn)定性就應該越高。這樣就可以耐受更加苛刻條件洗脫而偶聯(lián)的配基不會脫落。越是硬質(zhì)的介質(zhì)，耐受的流速也會越高。這樣更節(jié)省平衡洗脫的時間。
親和柱——親和層析原理
親和層析原理：利用生物分子之間的專一性識別性或特定的相互作用的分離技術(shù)稱為親和分離技術(shù)。在該技術(shù)中，親和分離過程是通過引入親和配基得以實現(xiàn)的。所謂親和配基，是指具有對生物分子專一識別性或特異相互作用的物質(zhì)。將親和配基固定在不同的介質(zhì)上，可得到不同的親合分離技術(shù)，如固定在層析介質(zhì)上，達到專一性層析分離的技術(shù)稱為親和層析技術(shù)。將親和配基接在分離膜上，得到親和膜分離技術(shù)。
親和柱——原理介紹
親和柱的功能基于抗原與抗體間可逆的特異性結(jié)合反應，使其可從復雜樣品基質(zhì)中特異性地回收目標化合物。上樣后，柱中以共價鍵形式偶聯(lián)在凝膠上的抗體會與抗原（即目標化合物）特異性結(jié)合，雜質(zhì)不會被結(jié)合，大部分隨樣品溶液流出小柱。通過淋洗的方式除去小柱內(nèi)剩余雜質(zhì)后，使用其他洗脫液（根據(jù)對應產(chǎn)品說明書選擇）進行洗脫即可得到潔凈的目標化合物溶液，可直接用于后續(xù)檢測。
親和柱介紹
目前，專用于黃曲霉毒素分離純化的固相萃取產(chǎn)品有兩類:
二是多功能凈化柱(MFC)它是一種特殊的SPE柱，以極性、非極性及離子交換等兒類基團組成填充劑，可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白類等雜質(zhì)，AFT不被吸附而直接通過，MFC的操作更為簡便，不需要進行活化、淋洗和洗脫操作只需直接上樣，10秒鐘內(nèi)即可完成整個凈化過程，凈化效果理想。
