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固相萃取柱的洗脫率一般在什么范圍

洗脫率與吸附劑、洗脫溶劑、保留體積、 流速等因素都有關(guān)，一般可達(dá)90%~98%。

原理：

固相萃取技術(shù)基于液相色譜原理，可近似看作一個簡單的色譜過程。原理是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附，與樣品的基體和干擾化合物分離，然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附，達(dá)到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。固相萃取可分為在線萃取和離線萃取。前者萃取與色譜分析同步完成，而后者萃取與色譜分析分步完成，兩者在原理上是一致的。

固相萃取柱的填料

固相萃取填料通常是色譜吸附劑，大致可以分為三大類，分別是以硅膠、高聚物、無機(jī)材料為基質(zhì)。

一類是以硅膠為基質(zhì)，如：Waters Sep-Pak C18固相萃取小柱，硅膠極性很強(qiáng)，呈弱酸性,可被用于正相或反相兩種分離模式：正相提取時，極性比硅膠弱，反相提取時非極性比C18 或 C8 的弱。對于類固醇有著較好的萃取效果通常用于非極性或弱極性化合物的萃取或極性雜質(zhì)的去除。主要用于血樣、尿樣中藥品及其代謝物、多肽脫鹽、環(huán)境樣品中的痕量有機(jī)化合物富集、飲料中的有機(jī)酸。

第二類是以高聚物為基質(zhì)，如：聚乙烯-二乙烯苯等。高純度、高交聯(lián)度的乙烯-二乙烯基苯聚合物為固定相填裝的萃取小柱具有高載樣量，可耐受極端 pH 條件和不同的溶劑，對極性化合物具有優(yōu)異的保留能力。可用作酸性的、中性的和堿性化合物的通用型吸附劑，通常用于反相條件下保留含有親水基團(tuán)的疏水性化合物如：酚類、硝基芳香類等。

第三類是以無機(jī)材料為主的，如：弗羅里硅藻土、氧化鋁、石墨化碳等。弗羅里硅土是一種氧化鎂復(fù)合的極性硅膠吸附劑，以此為基質(zhì)的萃取小柱適合于從非極性基質(zhì)中吸附極性化合物，如多多環(huán)芳烴、有機(jī)氯農(nóng)殘等；石墨化碳黑（CARB）萃取小柱, 以石墨化碳黑為填料，萃取過程非常迅速。且對化合物的吸附容量比硅膠大一倍有余，由于石墨化碳黑表面的正六元環(huán)結(jié)構(gòu)，使其對平面分子有極強(qiáng)的親和力，非常適用于很多有機(jī)物的萃取和凈化，尤其適于分離或去除各類基質(zhì)如水果、蔬菜中的色素、甾醇等物質(zhì)；以氧化鋁為基質(zhì)的填料有酸、堿、中性三種類型，適用于酸性、堿性的、中性溶劑的分離萃取。

固相萃取柱使用的基本步驟

1.預(yù)洗

預(yù)洗是用強(qiáng)溶劑預(yù)先淋洗小柱,以消除小柱上在生產(chǎn)或儲存過程中可能代入的污染物,當(dāng)在洗脫溶劑的洗脫力強(qiáng)于活化溶劑時一般要實施這一步。如果產(chǎn)品包裝密封并明確注明已進(jìn)行預(yù)洗就無需這一步。

2.活化

首先用較強(qiáng)(洗脫能力的) 溶劑潤濕吸附劑,而后再以較弱(洗脫能力的) 溶劑潤濕小柱,從而保證樣品在小柱上有足夠的保留。

3.上樣

選擇強(qiáng)度相對較弱的溶劑溶解樣品。液體樣品被加到SPE 小柱上后,不保留或弱保留的組分隨溶劑流出,待測組分和其他強(qiáng)保留組分保留在吸附上。

4.沖洗

用不會把待測組份洗脫出來的溶劑(樣品溶劑或稍強(qiáng)溶劑) 淋洗小柱,隨后通常采用抽真空或高速離心來排除殘余溶劑。

5.淋洗

用盡量少的較強(qiáng)溶劑將待測組分洗脫出來,而剩余較強(qiáng)的基體組分仍然保留在填料中。對于收集到的淋洗液,可進(jìn)一步吹干,用適當(dāng)溶劑定溶,也可用于直接進(jìn)樣。

固相萃取柱——萃取過程介紹

在固相萃取過程中，固相對分析物的吸引力大于樣品母液，當(dāng)樣品通過SPE柱時，分析物被吸附在固體表面，其他組分則隨樣品母液通過柱子，zui后用適當(dāng)?shù)娜軇⑵湎疵撓聛怼PE本身根據(jù)其原理可分為四種：反向SPE(RP-SPE)，正向SPE(NP-SPE)，離子交換SPE(IE-SPE)，和吸附SPE(Absorption)。在大多數(shù)情況下，固相萃取應(yīng)用于處理液體樣品，用來萃取、濃縮和凈化樣品中的揮發(fā)性和半揮發(fā)性化合物;當(dāng)需要用于固體樣品時，需先把固體樣品處理為液態(tài)。