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發布時間:2020-09-07 06:50  
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如何避免細胞抱團?1,用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細胞。2,對于貼壁非常牢固的細胞(如MDCK),為了細胞更好的狀態,更漂亮的樣子,建議分多批多次消化,這樣才能大限度地將胰酶對細胞的損傷降到低,保證細胞的狀態能夠優。3,消化過程中不要使勁搖動培養瓶,這樣細胞特別容易成屑樣脫落。細胞一旦脫落入懸液里就很難再將他吹打成單個(因為細胞沒有受力點了,所以細胞很難分散開)。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,嚴格控制好消化程度。
細胞抱團了,要如何處理?1,如果細胞抱團不影響生長就沒問題,只是計數的時候要麻煩點了。在消化的時候在細胞由多角形變成圓型之前,就用手輕磕培養瓶的側壁,使細胞從壁上脫落,就可以了!——不要吹打,對細胞性狀和生長都不好。2,如果感覺有死細胞的DNA,在細胞懸液中加入幾滴無菌的DNAse(1mg/ml溶于水)將DNA鏈打斷。輕柔地吹打細胞,防止對細胞膜造成物理損傷。
提高多肽穩定性的途徑:(1)定點突變 :通過基因工程手段替換引起多肽不穩定的殘基或引入能增加多肽穩定性的殘基,可提高多肽的穩定性。(2)化學修飾:多肽的化學修飾方法很多,研究多的是PEG修飾。PEG是一種水溶性高分子化合物,在體內可降解,無毒。PEG與多肽結合后能提高熱穩定性,抵抗蛋白酶的降解,降低抗原性,延長體內半衰期。選擇合適的修飾方法和控制修飾程度可體質或提高原生物活性。