生化試劑盒批發常用指南「在線咨詢」

組成編輯完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：(1)已包被抗原或的固相載體(吸附劑)；(2)酶標記的抗原或(結合物)；(3)酶的底物；(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標準品和控制(定量測定中)；(5)結合物及標本的稀釋液；(6)洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；(7)酶反應終止液，常用的HRP反應終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的終體積而異，在板式ELISA中一般采用3mol/L。



做好對照正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊、兔或BSA等封閉。實驗條件的選擇在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:（1）　固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚、聚、聚丙酰胺和纖維素等。



檢測及酶結合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準確地做稀釋工作，保證實驗結果的重復性。白介素6是一種,已被證實為B細胞分化因子.它是一種形成系統,它的生理特性,如肝細胞急性蛋白合成的誘導和基于和白介素3協同作用的生激等,也備受關注.并且已證實白介素-6與病理學存在穩定的相關關系.例如,報道多種疾病的生長因子為白介素-6, 瘤細胞能合成白介素-6并表達白介素-6受體。

操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。