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發布時間:2020-08-30 11:38  
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PCR實驗室的設計原則
使用實時熒光PCR儀,擴增區、擴增產物分析區可合并;
采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀,則標本制備區、擴增區、擴增產物分析區可合并。
PCR實驗室各區功能及主要設備
擴增產物分析區:擴增產物的測定。本區主要設備加樣器和水浴箱等。本區的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免擴增產物從本區擴散至其它區域。
PCR實驗室注意事項——擴增產物分析區
本區是主要的擴增產物污染來源,因此必須注意避免通過本區的物品及工作服將擴增產物帶出。在使用PCR-ELISA方法檢測擴增產物時,必須使用洗板,廢液必須收集至1 mol/L HCl中,并且不能在實驗室內傾倒,而應當至遠離PCR實驗室的地方棄掉。
PCR實驗室各區功能及主要設備
樣品制備區:主要進行樣品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。本區主要設備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。
PCR實驗室裝飾
實驗室圍護結構應牢固、氣密性好;所有陰陽角宜采用圓弧過渡;墻體內壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒;地面使用PVC卷材或環氧樹脂自流坪,材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
PCR實驗室布局
實驗室的氣流也應從擴增前區流向擴增后區,不得逆向流動。各工作區頂部應安裝紫外燈,紫外燈的波長為254nm,每20㎡一支40W的紫外燈。
PCR實驗室注意事項——標本制備區
由于在樣本混合、核酸純化過程中可能會發生氣溶膠所致的污染,可通過在本區內設立正壓條件,避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。
實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴增前區流向擴增后區,即從試劑準備區→樣品制備區→擴增區→擴增產物分析區,不得逆向流動。
PCR實驗室又叫基因擴增實驗,PCR是聚合酶鏈式反應簡稱。是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA,可看作生物體外的特殊DNA。通過DNA基因追系統,能迅速掌握生物體內的病毒含量,其精準度高達納米級別。