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              小RNA表達(dá)載體優(yōu)惠報(bào)價(jià)「友名生物」

              發(fā)布時(shí)間:2021-10-22 01:56  

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              酵母基因組DNA提取好方法

              DNA提取主要是CTAB方法,其他的方法還有物理方式如玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法。化學(xué)方式如異硫CN酸胍法、堿裂解法。生物方式:酶法。根據(jù)核酸分離純化方式的不同有;硅質(zhì)材料、陰離子交換樹脂等。

              提取基因組DNA和細(xì)胞核DNA是不同的方法

              提取細(xì)胞核要先把細(xì)胞破碎分離出細(xì)胞核,要在甘油或其他保護(hù)劑中進(jìn)行

              SDS十二烷基磺酸鈉:可破壞細(xì)胞膜、核膜,并使組織蛋白與DNA分離

              CATB是一種抽提液,破壞細(xì)胞膜的~

              DNA不溶于異丙1醇,異丙1醇可以析出DNA,產(chǎn)生白色絮狀沉淀,用槍頭挑出就可以了



              植物DNA的CTAB提取法:

              1 稱取新鮮葉片2-3g,剪碎放入研缽中,在液氮中研磨成粉末。

              2 將粉末轉(zhuǎn)移到的加有7ml經(jīng)預(yù)熱的1 5×CTAB提取緩沖液15ml離心管中,迅速混勻后置于65℃水浴中,溫育30min。

              3 取出離心管,冷卻至室溫,加入氯1仿/異戊1醇(24:1),充分混勻,室溫下2300×g離心20min。

              4 將上清轉(zhuǎn)移至另一新的15ml離心管中,加入1/10體積10%的CTAB和等體積的氯1仿/異戊1醇。充分混勻,2300×g離心20min。

              5 轉(zhuǎn)移上清至另一新的15ml離心管中,加入等體積1%的CTAB沉淀緩沖液,輕輕搖晃至形成DNA絮狀沉淀。1000×g離心10min,使DNA沉淀于管底。

              6 加入1 5-2ml的1mol/LNaCl及5μlRNase置于56℃水浴中過夜。待DNA完全溶解后,加2-3ml4℃預(yù)冷的95%的冰乙醇使DNA沉淀,挑出DNA,置于1 5ml離心管中,用70%乙醇清洗30min,用離心機(jī)甩5s,倒出70%乙醇,再用95%乙醇浸泡5min,倒出95%乙醇,在超凈工作臺(tái)上吹干。

              7 將風(fēng)干的DNA直接在4℃保存?zhèn)溆没蛉苡?00μlTE溶液中于-20℃保存。



                核酸檢測(cè)是確診新冠肺1炎的重要標(biāo)準(zhǔn),而檢測(cè)流程中的每一個(gè)環(huán)節(jié)都是精細(xì)活,容不得半點(diǎn)馬虎,是與病毒的正面交鋒,核酸檢測(cè)是如何“識(shí)別”病毒的?

                從樣本核對(duì)、取樣滅活、核酸提取、體系配制、上機(jī)擴(kuò)增到zui后結(jié)果分析,核酸檢測(cè)過程復(fù)雜繁瑣,為了保證結(jié)果準(zhǔn)確性需要一套嚴(yán)密流程,每一批樣本在實(shí)驗(yàn)室里至少需要4到6個(gè)小時(shí)的篩查,對(duì)于出現(xiàn)異常的樣本耗時(shí)則更長(zhǎng),一般檢測(cè)呈陽(yáng)性的樣本,會(huì)再次復(fù)核,一般都需要8到10個(gè)小時(shí)才能完成檢測(cè)報(bào)告。



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