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發布時間:2022-07-25 11:01  
2D和3D環境下培養的細胞相比較,諸多生理指標都顯著不同,例如原代小鼠管腔上皮細胞(mammaryluminal epithelial cells, MEC)在3D基底膜基質中增殖的時間明顯長于2D培養環境;更有甚者,有時作用于2D培養的細胞呈現的效應與3D細胞相反。3D培養可以設計模擬體內的生理環境,讓細胞在生理行為上與機體實際的生理環境更接近。隨著在生物相關性,PGA,通量,產出量等方面的改進,伴隨3D培養成本的降低,3D培養在再生醫學,基礎研究和研發中的應用將越來越廣泛,PGA三維細胞培養支架,一場細胞由2D培養走向3D的變革正在發生。

靜電紡絲法以六氟異丙1醇(HFIP)為溶劑,將質量比為70∶30的SF/COL(絲素/膠原)和PLLC(聚左旋乳酸己內酯)共混制備質量比為0∶100,30∶70,50∶50,70∶30,100∶0的8%SF/COL/PLCL的三維納米纖維支架,25%蒸汽交聯48h后檢測各組比例支架材料的理化性能及生物性能。掃描電鏡顯示納米纖維形貌良好,均為納米級別;X射線衍射結果顯示交聯后材料結晶度增強,SilkⅠ構象由α-折疊形成穩定的β-折疊;材料交聯后為疏水性,PLCL的加入明顯改善材料的親水性能;熱穩定性隨著PLCL濃度的增加也愈加穩定,交聯后尤其明顯。細胞培養實驗證明,隨著培養時間延長,細胞在不同比例的支架上粘附、鋪展和增殖均良好,但hPDLSCs與配比為30∶70的SF/COL/PLCL支架復合后增殖速率快。

天然ECM作為支持材料的3D培養
這種方法以天然ECM作為支持材料,PGA組織培養支架,根據培養細胞類型,優化3D培養基質配方,以滿足不同組織細胞的培養需求。很多公司都可提供細胞外基質產品用于3D培養,PGA3D細胞培養支架,例如TAP Biosystems(已被Sartorius Stedim Biotech收購)的RAFT膠原系統,Matrigel模擬基底膜基質產品;Advanced BioMatrix,Amsbio和Sigma-Aldrich公司也都有細胞外基質凝膠產品。但天然基質材料存在一定病原風險,且材料可能存在批次差別性等缺點。

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