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發布時間:2021-10-23 05:26  
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液相色譜
液相色譜是一類分離與分析技術,其特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。在色譜技術發展的過程中.為了區分各種方法,根據固定相的形式產生了各自的命名,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。經典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱,因此固定相的粒度不可能太小(100μm~150μm左右)。分離后的樣品是被分級收集后再進行分析的,使得經典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢,而且操作也比較復雜。
什么是制備性液相色譜
液相色譜是一種分析方法,制備色譜是一種分離純化手段。液相色譜把普通的色譜柱換成制備柱,就是制備液相色譜,兩者的區別在于一種以分析為目的,追求的是檢測精度,樣品承載量非常小;制備色譜以分離純化為目的,它追求的是樣品承載量,檢測精度很低,檢測只用作鑒別即可。
另外,制備色譜不僅可以用液相,還可以用氣相色譜、薄層色譜、層析柱等多種載體,目前主流的制備色譜是高速逆流色譜
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制備液相色譜特點和優點
高壓—壓力可達150~300Kg/cm2。色譜柱每米降的壓為75 Kg/cm2以上。
高速—流速為0.1~10.0 ml/min。
高效—可達5000塔板每米。在一根柱中同時分離成份可達100種。
高靈敏度—紫外檢測器靈敏度可達0.01ng。同時消耗樣品少。
HPLC與經典液相色譜相比有以下優點:
速度快—通常分析一個樣品在15~30 min,有些樣品甚至在5 min內即可完成。
分辨率高—可選擇固定相和流動相以達到較好分離效果。
靈敏度高—紫外檢測器可達0.01ng,熒光和電化學檢測器可達0.1pg。
柱子可反復使用—用一根色譜柱可分離不同的化合物。
樣品量少,容易回收—樣品經過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。
高效液相色譜儀原理
高效液相色譜法的原理是在原始的經典色譜法基礎上面引用氣象色譜的理論,把原來的流動性改變為很高壓力可達到4.9′107Pa。色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成。造成的結果就是色譜柱的柱效遠遠高于原始的經典液相色譜。并且它柱子使用后還能具有高度靈敏度檢測器。能夠對流出來的分析物進行連續檢測。